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病理切片制作流程之固定和水洗

來(lái)源:http://m.orqossz.cn/    日期:2019-07-15    瀏覽量:載入中...

      病理切片廠家開(kāi)課啦!我們說(shuō)說(shuō)制作病理切片過(guò)程中的固定和水洗,廢話不多說(shuō)讓我們開(kāi)始吧!

      固定是技術(shù)室工作的第一步,也是在整個(gè)制片過(guò)程中無(wú)法補(bǔ)救的一步。所謂“固定”,就是組織離體后,用各種辦法使其細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過(guò)程。固定的目的是為了防止組織細(xì)胞自溶與腐敗,防止了細(xì)胞內(nèi)的酶對(duì)蛋白質(zhì)的分解作用,使細(xì)胞內(nèi)的各和成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物或酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。

病理玻片

      另外,組織固定后,均呈一定的硬化狀態(tài),增加組織韌性,而且不易變形,有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時(shí)固定,固定液的量應(yīng)為組織的5倍。固定的關(guān)鍵主要與固定的及時(shí)性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時(shí)間有關(guān)。最常用的固定液為10%福爾馬林。筆者認(rèn)為,10%福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時(shí)的揮發(fā)和取材時(shí)帶入的水分影響,濃度被降低致組織固定不足,而高濃度的福爾馬林,降低了對(duì)組織的穿透性,形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。通過(guò)實(shí)踐,本人認(rèn)為以酸性12~15%的福爾馬林最佳。大標(biāo)本(2cm厚)一般需要6~12個(gè)小時(shí),小標(biāo)本一般需要3~6個(gè)小時(shí);當(dāng)室溫低18℃時(shí),可在37℃以下的溫箱內(nèi)加溫4~6個(gè)小時(shí)。由于HE染色最佳著色PH為3.5~4.5,?中性福爾馬林對(duì)蘇木素染色有一定影響,細(xì)胞核容易發(fā)灰,核染色質(zhì)不佳。所以,?盡管中性福爾馬林對(duì)抗原有很好的保存作用,但酸性福爾馬林對(duì)絕大多數(shù)抗原來(lái)說(shuō)也有很好的保存作用,所以在沒(méi)有特別處理的情況下常規(guī)HE用12~15%酸性福爾馬林也可以(每100毫升12~15%福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸)。骨髓、結(jié)締組織固定以Bouin液為佳,經(jīng)Bouin液固定后的組織必須流水沖洗4小時(shí)以上。有條件的單位可根據(jù)不同要求選用二種或二種以上的固定液;少數(shù)單位還可建立組織冷凍庫(kù),以便適應(yīng)各種特殊的處理要求。

      固定后水洗(10~20分鐘),通常被很多人所忽視,而水洗不徹底,容易造成脫片和染色不鮮艷。對(duì)需做免疫組織化學(xué)的組織,更不應(yīng)當(dāng)忽視。福爾馬林不利于組織塊內(nèi)抗原的保存。

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