顯微鏡生物玻片的制作可分為以下三步:
清洗生物玻片、制作涂片、制作裝片
1、切片清洗
顯微鏡標(biāo)本切片的清洗將直接影響生產(chǎn)質(zhì)量,因此制作顯微鏡標(biāo)本切片的第一步是清洗載玻片和蓋玻片。
新購(gòu)買的生物玻片不可以直接用,要先在95%的酒精中浸泡,去除表面的附著物,在使用前取出,晾干或烘干備用。
用過(guò)的舊生物玻片,先用肥皂水或洗衣粉水煮0.5h,冷卻后用軟刷刷掉污垢,用自來(lái)水沖洗,放入95%酒精中備用。如果是石蠟切片,可以先在二甲苯中浸泡幾個(gè)小時(shí)(可以用制片時(shí)回收的廢棄二甲苯,既能避免環(huán)境污染,又能節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本),溶解用于密封的樹膠,將蓋玻片和玻片分開(kāi),然后用肥皂水煮。
對(duì)于非常臟的舊玻璃片,可以先用洗液浸泡24小時(shí)(洗液準(zhǔn)備:取重鉻酸鉀50g,加水300ml,加熱攪拌溶解。冷卻后,慢慢注入250ml的濃硫酸,邊加邊攪拌,可以長(zhǎng)時(shí)間使用)。取出后用自來(lái)水沖洗,放入95%的酒精中備用。
2、涂片的制作
為了防止細(xì)胞自溶現(xiàn)象的發(fā)生,取材要快速,操作要輕巧,防止細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷。
涂層要均勻,厚度要適中,細(xì)胞堆疊過(guò)厚,細(xì)胞過(guò)薄,影響觀察。操作時(shí),應(yīng)在載玻片上涂上淡淡的樣品。如樣品細(xì)胞密度過(guò)大時(shí),如果精液過(guò)濃,可以在涂片前用生理鹽水稀釋。
3.裝片的制作
為了保持細(xì)胞的正常形態(tài),在觀察動(dòng)物組織細(xì)胞的臨時(shí)裝片時(shí),應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的不同類型使用相應(yīng)的生理鹽水。例如,0.9%的生理鹽水用于哺乳動(dòng)物和其他溫血?jiǎng)游铮?.65-0.7%的生理鹽水用于兩棲動(dòng)物和其他冷血?jiǎng)游铮?.45%的生理鹽水用于無(wú)脊椎動(dòng)物,過(guò)濾海水用于無(wú)脊椎動(dòng)物。